Um estudo liderado pelo
Instituto Oswaldo cruz (IOC/Fiocruz) e pela Universidade Federal de Juiz de
Fora (UFJF), em colaboração com hospitais e centros de pesquisa do Rio de
Janeiro, traz novas informações que ajudam a entender uma das complicações mais
graves e frequentes observadas em pacientes com Covid-19 hospitalizados em
Unidades de Terapia Intensiva (UTIs). Publicado na Blood, principal revista
científica internacional na área de hematologia e coagulação, o trabalho volta
os olhos para os impactos do vírus no sangue e chama atenção, em especial, para
as plaquetas, células fundamentais para o processo de coagulação.
Embora o coronavírus afete principalmente os pulmões, evidências anteriores já haviam mostrado que, nos casos graves, a Covid-19 também altera os processos de coagulação sanguínea. Frequentemente, esses pacientes apresentam uma coagulação exagerada, com formação de agregados de células sanguíneas e proteínas, que são chamados de trombos. A formação de trombos pode interromper a circulação, provocando trombose, infartos ou embolia pulmonar, o que está associado a casos mais graves e, inclusive, a casos fatais.
“Na beira do leito, os
profissionais de saúde estão acompanhando a evolução dos casos graves e atentos
aos eventos trombóticos. Nosso estudo se dedicou a entender como, nestes
pacientes, o vírus interfere nas etapas iniciais da cascata de processos que
deflagram a coagulação. Processos, estes, em que as plaquetas atuam de forma
importante”, sintetiza Eugênio Hottz, professor da Universidade Federal de Juiz
de Fora (UFJF), pesquisador colaborador do Laboratório de Imunofarmacologia do
IOC e primeiro autor do trabalho.
Para investigar os mecanismos
envolvidos nesse processo, os pesquisadores analisaram e compararam amostras de
sangue e do trato respiratório de pacientes com diferentes apresentações da
Covid-19, incluindo pacientes com quadros graves, que precisaram ser internados
em unidades de terapia intensiva (UTIs), pacientes com manifestações leves e
pessoas assintomáticas. Amostras de voluntários saudáveis também foram
incluídas no estudo para comparação.
As análises realizadas por
técnicas de citometria de fluxo e de microscopia tiveram o objetivo de
identificar, nas diferentes amostras, quais alterações poderiam ser observadas
nas plaquetas e na cascata de ativação de fatores que levam à coagulação, o que
acontece no nível das moléculas. Amostras foram coletadas dos pacientes no
início da hospitalização e os mesmos foram acompanhados durante toda a
internação, para que a evolução do caso no hospital pudesse ser associada aos
achados do laboratório, do ponto de vista dos impactos do vírus para a dinâmica
sanguínea.
De acordo com os experimentos,
nos pacientes com formas graves de Covid-19 houve aumento na ativação das
plaquetas e foi observada uma forte agregação entre plaquetas e monócitos,
células que atuam na defesa contra infecções – o que não ocorreu nas amostras
dos pacientes com manifestações leves ou nos casos assintomáticos. Os
pesquisadores conseguiram mapear duas moléculas que atuam fortemente neste
processo de adesão entre plaquetas e monócitos: as moléculas CD62P e αIIb/β3.
Além disso, foi constatado que a ativação das plaquetas induz os monócitos a
expressarem uma proteína, chamada de fator tecidual, o que inicia todo o
processo de coagulação.
Comparando os resultados
obtidos em laboratório com o desfecho dos casos dos pacientes que foram
acompanhados ao longo do estudo, tanto os níveis de ativação plaquetária quanto
os níveis de expressão do fator tecidual nos monócitos estiveram diretamente
associados à gravidade do quadro clínico e ao prognóstico da doença, com maior
possibilidade de evolução para ventilação mecânica e também para óbito naqueles
com maior ativação. “Nossos resultados indicam que a ativação das plaquetas e
sua associação com monócitos, com formação de agregados plaquetas-monócitos,
são importantes para o disparo da coagulação sanguínea”, afirma a pesquisadora
Patricia Bozza, chefe do Laboratório de Imunofarmacologia do IOC e coordenadora
do estudo.
“Nossos resultados mostram que
ocorre ativação de plaquetas nos casos graves de Covid-19. Ainda não sabemos se
a ativação das plaquetas causa agravamento do quadro ou se esta ativação é
apenas mais um dos muito processos envolvidos na infecção pelo vírus. De
qualquer modo, monitorar a ativação das plaquetas como um marcador para indicar
um potencial de agravamento já é uma conclusão obtida na bancada do laboratório
que pode vir a ser adotada no manejo clínico”, Eugênio resume.
O trabalho sugere que a grande
liberação de mediadores inflamatórios no plasma de pacientes em casos graves de
Covid-19 pode ser uma das causas da maior ativação das plaquetas nessas
pessoas. Também aponta que a inibição de moléculas que atuam no processo de
adesão e sinalização entre plaquetas e monócitos pode interromper a expressão
do fator tecidual, apontando possíveis caminhos para a busca de terapias. Neste
sentido, o anticorpo monoclonal Abciximab, que já é largamente utilizado para
evitar a formação de trombos após cirurgias, foi uma das substâncias testadas
com sucesso nos ensaios in vitro. “Esses resultados abrem possibilidade de
continuarmos a investigação para identificar terapias capazes de atuar nos
eventos de ativação plaquetária na Covid-19”, declara Patricia.
“Desde o início da pandemia,
têm sido relatadas alterações de coagulação, especialmente com eventos
trombóticos em pacientes graves. Esta é uma preocupação de todas as equipes que
tratam de pacientes com Covid-19 grave. Identificar os fatores que causam estas
alterações é fundamental para se estabelecer novas terapias para estes
pacientes. A colaboração entre grupos de pesquisa básica e de pesquisa clínica
foi fundamental para responder a estas questões”, sintetiza o pesquisador
Fernando Bozza, que atua no Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas
(INI/Fiocruz) e no Instituto D’Or.
Pesquisa translacional e
colaborativa
Com experiência em estudos
sobre resposta tromboinflamatória, o Laboratório de Imunofarmacologia do IOC
tem se debruçado principalmente sobre as arboviroses e realizou achados
importantes relacionados ao papel das plaquetas na dengue grave nos últimos
anos. A partir da emergência da Covid-19, a equipe uniu esforços a cientistas
de diferentes instituições para realizar um estudo translacional, integrando
dados clínicos e de bancada, em busca de respostas.
“O caráter translacional da
pesquisa se deve à formação de uma equipe multidisciplinar, envolvendo
diferentes instituições de pesquisa e hospitais. Isso nos permitiu realizar uma
avaliação precoce de amostras obtidas de pacientes, identificar os perfis
celulares e correlacionar os achados laboratoriais com os aspectos clínicos. É
essa abordagem translacional, multidisciplinar e multicêntrica que nos permite
associar a informação do laboratório ao que está ocorrendo na clínica”, destaca
Eugênio Hottz.
Além do IOC/Fiocruz e da UFJF, participaram da pesquisa o Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde (CDTS/Fiocruz), Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas (INI/Fiocruz), Instituto Estadual do Cérebro Paulo Niemeyer e Instituto D’Or de Pesquisa e Ensino. O trabalho foi financiado pela Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (Faperj), Programa Inova Fiocruz, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes) e pelo Instituto D’Or.
